|
上海闪晶分子生物科技有限公司
联系人:易清风 女士 (销售) |
|
电 话:021-54460831 |
|
手 机: |
|
|
|
|
|
供应PCR 扩增 |
闪晶公司有扩增性能好、保真性能强的各种 PCR 反应试剂,可满足您对各种模板进行 PCR 扩增的要求。
样品要求:
请您提供模板(质粒、基因组 DNA 、 PCR 产物等) 10 ml 以上(标明浓度 ) 、上下游引物(通常提供 0.2OD 以上 ) 、扩增产物的用途等。
提供结果:
PCR 扩增产物、电泳照片差减杂交PCR
差减杂交(Subtractive hybridization)的原理非常简单,首先将RNA反转录为双链cDNA,称为tester(含有目的基因);对照RNA(不含目的基因)同样处理,产生cDNA为driver,微量的tester和过量的driver在合适的条件下杂交,tester中和driver中相同的基因杂交子就被除去,在tester中独特的基因被富集,通过PCR方法扩增出来,得到差减庫,扩增产物可以通过T载体直接克隆和测序分析。在探讨两个相关组织或两个关联过程中基因表达差异的情况,通过该方法可以获得某些基因在某一样品中表达,而在对应的样品中不表达或表达量很低。
该方法也可以用于基因组特异片段的筛选,差别在于前者用mRNA为实验材料,后者用基因组DNA或其它可比样品的DNA为材料,两者的后半部分实验内容完全相同,前者得到的主要是差异表达的基因,后者得到的主要是差异片段。
客户需提供两个样品确实存在显著差异的证据,并告知打算得到哪个样品中被上调或下调的基因。如果同时想知道上调和下调的基因,则相当于两个服务,价格加倍。
实验结束后我们会提供筛选到的含有差异基因的质粒,用两个样品制备的cDNA制备的探针对筛选到的差异克隆进行Southern鉴定的图片一幅,以及简明实验步骤。 |
|
|